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免疫熒光實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù)

免疫熒光實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù)
服務(wù)項(xiàng)目:包埋→切片→免疫熒光(單標(biāo))→免疫熒光(雙標(biāo))→抗體費(fèi)用→全景掃描(單標(biāo))→全景掃描(雙標(biāo))→免疫熒光分析
樣本運(yùn)輸:常溫運(yùn)輸(4%多聚甲醛固定,可加冰袋運(yùn)輸)
信帆生物提供各類實(shí)驗(yàn)代測(cè),更多服務(wù)項(xiàng)目歡迎致電咨詢,我們將竭誠(chéng)為您服務(wù)!

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2024-10-26
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詳細(xì)介紹

免疫熒光實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù)

兔疫熒光技術(shù)是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來的一項(xiàng)技術(shù)。它是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理,先將已知的抗原或抗體標(biāo)記上熒光基團(tuán),再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原(或抗體)。利用熒光顯微鏡可以看見熒光所在的細(xì)胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質(zhì)和定位,以及利用定量技術(shù)(比如流式細(xì)胞儀)測(cè)定含量。

免疫熒光實(shí)驗(yàn)說明:

1、確認(rèn)要做的是單標(biāo)還是雙標(biāo).

2、免疫熒光拍照免費(fèi)。

3、免疫熒光要做預(yù)實(shí)驗(yàn)。

4、全景掃描可看任意倍數(shù)。

 

冰凍切片熒光tunel+免疫熒光雙標(biāo)實(shí)驗(yàn)步驟

1、 冰凍切片固定:冰凍切片從冰箱拿出來復(fù)溫,晾干水分,冷丙酮固定10min,待丙酮*干后于PBSPH7.4中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次,每次5min。

2、 修復(fù):切片稍甩干后用組化筆在組織周圍畫圈(防止液體流走),在圈內(nèi)滴加蛋白酶K工作液(蛋白酶K儲(chǔ)存液用PBS 1:9稀釋)覆蓋組織,37度溫箱孵育30min。將玻片置于PBSPH7.4中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次,每次5min。

3、 破膜:切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加破膜工作液覆蓋組織,常溫下孵育20min,將玻片置于PBSPH7.4中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次,每次5min。

4、 加試劑1,2:按片子數(shù)量和組織大小取tunel試劑盒內(nèi)適量試劑1 (TdT) 和試劑2(dUTP)2:29混合(試劑1,2為現(xiàn)配現(xiàn)用),加到圈內(nèi)覆蓋組織,切片平放于濕盒內(nèi),37℃恒溫孵育2小時(shí),濕盒內(nèi)加少量水保持濕度。

5、 BSA封閉:將玻片置于PBSPH7.4中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次,每次5min在圈內(nèi)滴加3%BSA均勻覆蓋組織,室溫封閉30min

6、 加一抗:輕輕甩掉封閉液,在切片上滴加PBS按一定比例配好的一抗,切片平放于濕盒內(nèi)4°C孵育過夜。(濕盒內(nèi)加少量水防止抗體蒸發(fā))

7、 加二抗:玻片置于PBSPH7.4中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加與一抗相應(yīng)種屬的二抗覆蓋組織,避光室溫孵育50min。

8、 DAPI復(fù)染細(xì)胞核:PBSPH7.4洗滌3次,每次5min。去除PBS后在圈內(nèi)滴加DAPI染液,避光室溫孵育10min。

9、封片:玻片置于PBSPH7.4中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后用抗熒光淬滅封片劑封片。

10、 鏡檢拍照:切片于尼康倒置熒光顯微鏡下觀察并采集圖像。(紫外激發(fā)波長(zhǎng)330-380nm,發(fā)射波長(zhǎng)420nmFITC綠光激發(fā)波長(zhǎng)465-495nm,發(fā)射波長(zhǎng)515-555 nm;CY3紅光激發(fā)波長(zhǎng)510-560,發(fā)射波長(zhǎng)590nm

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