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HE-染色實驗

HE-染色實驗,簡稱HE染色法 ,石蠟切片技術里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿性 ,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核酸著紫藍色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色 。

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  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2024-10-06
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詳細介紹

HE-染色實驗


產品名稱】:HE染色                                                

背景介紹】:

蘇木精-伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,簡稱HE染色法 ,石蠟切片技術里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿性 ,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核酸著紫藍色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色 。

常規(guī)染色或HE(Haematoxylin and eosin)染色。它是病理技術中常用的一種方法,通過它可以做出病理診斷和發(fā)現尋求別的輔助方法,以達到準確,完整的病理診斷。蘇木精染液為堿性 ,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色 。HE染色法是組織學、胚胎學、病理學教學與科研中基本、使用廣泛的技術方法。

 

HE染色使用說明】:

1、細胞可做HE染色,貼壁細胞做爬片后染色,懸浮細胞做滴片后染色。

2、拍照倍數分100倍,200倍,400倍。正常情況下拍照是200倍3張,400倍3張。

3、全景掃描可看任意倍數。

 

HE染色實驗步驟】:

1、樣本組織固定與切片:首先將組織樣本進行常規(guī)的石蠟包埋。在模具中加入液態(tài)石蠟,將待包埋的組織樣本放入石蠟中,確保組織位置規(guī)整。補充少許液態(tài)的石蠟后,進行降溫冷凍,使石蠟變?yōu)楣虘B(tài)達到組織固定的效果,然后使用石蠟切片機進行切片,厚度在4-8um左右。將切完后的組織切片放入載玻片上使用40℃溫水浸泡使組織充分伸展。

2、組織樣本脫蠟:將待測組織樣本切片放于二甲苯中,充分浸泡10min,浸泡完后更換二甲苯繼續(xù)浸泡10min,目的是使用二甲苯將切片中的石蠟溶解,這樣可以在進行染液染色的時候,染液可以充分進入組織種,同時,二甲苯還可以起到透明的作用,使切片更容易觀察。

3、組織樣本水化:將浸泡過二甲苯的待測組織樣本先放入無水乙醇中浸泡5min,使脫蠟時用的二甲苯可以被洗脫出去,使水可以進入組織中;再依次置于95%、85%、70%乙醇中各浸泡5min以達到充分水化的效果。

4、組織切片蘇木-素染色、分化與反藍:將水化后的組織樣本的切片使用PBS溶液浸泡清洗,每次浸泡5min,總共清洗3次。之后用移液槍吸取已經預先配制好的蘇木-素染色液,每個組織切片滴加100ul,充分染色10min。染色完畢后使用蒸餾水洗去多余的蘇木-素染色液。然后再使用1%的鹽酸乙醇進行分化,使細胞核中結合過多的染液和細胞漿中的多余的染液被除去。分化完成后,再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。為了使蘇木-素染藍色,使用弱堿性的促藍液加入組織切片中,讓細胞核染藍色。反藍結束后先用清水進行清洗,再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。

5、組織切片伊紅染色與脫水:向上一步驟的組織樣本切片中加入伊紅染液,并使組織可以充分染色3min,染色完畢后,再將組織切片進行梯度脫水,分別使用濃度為80%、95%以及無水乙醇進行操作。80%的乙醇脫水5s,95%乙醇脫水2min,無水乙醇脫水2min。

6、組織樣本切片風干封片:將脫水后的組織樣本切片使用二甲苯浸泡2次,每次持續(xù)4min,然后將組織樣本切片干,并使用中性樹膠封片。

7、最后在顯微鏡下觀察并拍照。

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HE-染色實驗 

 

 

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