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DNS 試劑(NY/T 法)操作說明

更新時間:2024-08-15      瀏覽次數(shù):1335

DNS 試劑(NY/T 法)操作說明


產(chǎn)品簡介:

植物體內(nèi)的碳素營養(yǎng)狀況以及農(nóng)產(chǎn)品的品質(zhì)形狀,常以糖含量作為重要指標,單糖和某些寡糖(如麥芽糖)含有游離的醛基或酮基,具有還原性,屬于還原糖;多糖和蔗糖等屬于非還原糖,可以利用多糖能被酸水解為單糖的特性,通過測定水解后的單糖含量對總糖進行測定。

DNS試劑(NY/T法)由氫氧化鈉、3,5-二硝基水楊酸、酒石酸鉀鈉、酚等配制而成,DNS濃度為6.3g/L,是植物總糖和還原糖檢測(硝基水楊酸法)的成分之一,其檢測原理是還原糖在堿性條件下被氧化成糖酸,3,5-二硝基水楊酸被還原為棕紅色的氨基化合物,在一定范圍內(nèi)還原糖的量與棕紅色產(chǎn)物的顏色深淺程度呈一定比例關(guān)系,在540nm處測定棕紅色物質(zhì)的吸光度,該吸光度值與還原糖含量呈線性關(guān)系,利用比色法和標準曲線測得樣品中的還原糖和總糖的含量。DNS試劑也常用淀粉酶、纖維素酶、木聚糖酶等的活性測定。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。 


產(chǎn)品名稱:DNS試劑(NY/T法)

產(chǎn)品貨號:XF0284

規(guī)格:100ml

儲存條件:室溫,避光

有效期:12個月

用途:農(nóng)業(yè)部標準法DNS試劑。又稱3,5-二硝基水楊酸法或簡稱DNS法,DNS試劑是植物總糖和還原糖檢測(硝基水楊酸法)的成分之一,定量檢測植物組織樣品中的總糖和還原糖的含量。3,5-二硝基水楊酸濃度為6.3g/L。


自備材料:

1、蒸餾水、鹽酸溶液、氫氧化鈉溶液

2、剪刀、勻漿器或研缽、50ml 離心管、離心機、水浴鍋或恒溫箱、分光光度計、比色皿


操作步驟(僅供參考):

1、還原糖的提取:

①稱取植物樣品 0.5~3g,剪碎,加入蒸餾水約 3ml 勻漿,轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中,用12ml 蒸餾水沖洗研磨器 2~3 次,洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。

②50℃水浴 30min,并不時攪拌,以便還原糖徹-底浸出。

③將沉淀和浸出液轉(zhuǎn)移至 50ml 離心管,4000g 離心。

④留取上清液,向沉淀中加入 20ml 蒸餾水,混勻,再次 4000g 離心。

⑤留取上清液,將 2 次獲得的上清液合并,用蒸餾水定容至 100ml(提取液),混勻,作為還原糖待測液。

2、總糖的水解和提?。?/p>

①稱取植物樣品 0.5~3g,剪碎,加入蒸餾水約 3ml 勻漿,轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中,用12ml 蒸餾水沖洗研磨器 2~3 次,洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。

②向容器中加入 10ml 6M 鹽酸溶液,攪拌均勻,煮沸,并不時攪拌。

③取 2 滴滴加于載玻片上,滴加 1 滴顯色液,檢查水解是否完-全,如已經(jīng)水解完-全則不顯示藍色。

④水解完畢后,冷卻至室溫,加入 6M 氫氧化鈉溶液,使溶液 pH 至7.4 左右,用蒸餾水定容至 100ml,混勻,4000g 離心或過濾,獲得上清或濾液。

⑤取上清或濾液 10ml,用蒸餾水定容至 100ml,成稀釋 10 倍的總糖水解液(提取液),取 1ml 總糖水解液,測定其還原糖的含量。

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