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更新時(shí)間:2023-02-03      瀏覽次數(shù):976

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ELISA的基本原理:

①使抗原或抗體結(jié)合固相載體表面,并保持活性。
②使抗體或抗原與某種酶連接成酶標(biāo)抗體或抗原。
③在測定時(shí),把受檢抗體(或抗原)和酶標(biāo)抗原(或抗體)按不同的步驟與固相載體表面的抗原(或抗體)起反應(yīng)。
④用洗滌的方法去除未結(jié)合的酶標(biāo)抗原(或抗體),zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。
⑤加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物。
⑥產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺來定性或定量分析。

   ELISA方法的基本原理是:使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時(shí),把受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開,zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高,故可極大地地放大反應(yīng)效果,從而使測定方法達(dá)到很高的敏感度。因此,ELISA檢測是一項(xiàng)定位、定性和定量(敏感度可達(dá)每毫升ng~pg水平)的綜合技術(shù)。常用的酶是辣根過氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酶(AKP)

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