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肝素-瓊脂糖凝膠6FF的應(yīng)用有哪些

更新時間:2022-12-22      瀏覽次數(shù):711

肝素-瓊脂糖凝膠6FF的應(yīng)用有哪些



產(chǎn)品名稱:肝素-瓊脂糖凝膠 6FF


特點(diǎn):基團(tuán)脫落少,結(jié)合特異性強(qiáng)


基質(zhì):6%的交聯(lián)瓊脂糖凝膠


配基:肝素


配基密度:2-4mg/ml


吸附載量:2-3mg 抗凝血因子Ⅲ(AT Ⅲ )/ml


顆粒大?。?5-165μm


最大流速:300cm/h


pH范圍:4-10,在位清洗時pH范圍可到3-13


保存條件:4~8℃密閉保存


應(yīng)用:肝素能和抗凝血因子Ⅲ、凝血因子、蛋白合成因子、脂蛋白、干擾素、核酸結(jié)合蛋白、限制內(nèi)切酶、凝血酶及類凝血酶等生物大分子結(jié)合,所以肝素瓊脂糖凝膠可以用于這類物質(zhì)的純化。





肝素-瓊脂糖凝膠 6FF


肝素是一種含硫酸酯的酸性多糖,將它偶聯(lián)到活化的瓊脂糖凝膠上,該填料具有很高的物理化學(xué)穩(wěn)定


性。 肝素能和凝血因子和其他血漿蛋白,脂蛋白,蛋白質(zhì)合成因子,作用于核酸和類固醇受體的酶,所


以肝素瓊脂糖凝膠可以用于這類物質(zhì)的純化。


1 親和填料特性


基質(zhì) 6%的交聯(lián)瓊脂糖凝膠


配基密度 2-4 mg/ml


吸附載量 2-3mg 抗凝血因子Ⅲ(AT Ⅲ )/ml


親和填料的顆粒大小 45-165μm


最大流速* 300cm/h


pH范圍 4-10


使用溫度 4℃~常溫


*層析柱50mm*60cm,柱床高度25cm,20 °C


2 使用方法


肝素-瓊脂糖凝膠 6FF 對于不同的樣品的親和力不同,吸附載量取決于流速、pH、緩沖液組成和溫度


等參數(shù)。


2.1 裝柱


(1)讓所有的材料和試劑均平衡至層析實(shí)驗(yàn)的溫度。配制緩沖液,對所有的緩沖液進(jìn)行脫氣處理。


(2)檢查層析柱所有部件,特別是過濾網(wǎng),密封圈,螺旋塞是否緊密,玻璃管是否干凈和完整。


(3)根據(jù)需要量取相應(yīng)量的凝膠,用去離子水清洗掉 20%乙醇。


(4)將柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位,務(wù)必使底端無氣泡。


(5)用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口,使凝膠


在柱內(nèi)自由沉降,連結(jié)好柱子頂端柱頭。


(6)打開蠕動泵,讓緩沖液用使用時流速的 1.33 倍的流速流過,使柱床穩(wěn)定(注意壓力不要超過填


料最大耐壓)。


2.2 樣品的制備


樣品應(yīng)溶解,并且與結(jié)合緩沖液的pH值相同。為了避免堵塞層析柱,我們建議通過0.45μm過濾器


進(jìn)行離心和過濾,以去除細(xì)胞碎片或其他顆粒物質(zhì)。



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