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液體樣本甘油檢測(cè)試劑盒這么操作更準(zhǔn)確

更新時(shí)間:2022-04-26      瀏覽次數(shù):864

 

液體樣本甘油檢測(cè)試劑盒這么操作更準(zhǔn)確


上海信帆生物供應(yīng)甘油檢測(cè)試劑盒,可以檢測(cè)的樣本包括血液、細(xì)胞培養(yǎng)基、體液、酒類飲料中的甘油濃度。

 

ATP 3-,產(chǎn)過(guò)氧 化氫;在過(guò)氧化物酶作用下生色底物轉(zhuǎn)化為苯醌亞胺,其光密度值與甘油濃度成正比。

適用范圍:測(cè)定血液、細(xì)胞培養(yǎng)基、體液、酒類飲料中的甘油濃度。

 

R1 試劑 40 ml R2 試劑 10 ml

4 mmol/L 甘油標(biāo)準(zhǔn)品 1 ml

4 oC,儲(chǔ)存 6個(gè)月。

 

所需設(shè)備:酶標(biāo)儀、生化分析儀或 721、722 型可見(jiàn)光分光光度計(jì)。最佳工作波長(zhǎng) 550nm,如 無(wú)此波長(zhǎng)建議優(yōu)先選用 570nm、次選 530490nm。

 

操作步

. 樣本處酒類、飲品、清澈液體樣本:可直接進(jìn)行測(cè)定,如超過(guò)線性范圍可用蒸餾水或生理鹽水稀釋后 再測(cè)定。

培養(yǎng)無(wú)、無(wú)細(xì)養(yǎng)基,細(xì)應(yīng) 4oC,,12,000g 5min,

取上清進(jìn)行測(cè)定。

凝血4oC,2,000g 5min 漿;4oC 2h , 2000g 10min,細(xì)漿/70oC 10 內(nèi)肪酶,12,000g 離心 10min ,取上清測(cè)定或-20oC 保存。

 

.工作溶液配制: 4:1 比例,取 4 ml 試劑 R1 1 ml 試劑 R2 混合,立即使用或 4oC 保存

<1 天,變色棄去。

 

.標(biāo)準(zhǔn)品稀釋:用蒸餾水、生理鹽水或與樣品緩沖液一致的液體,將 4 mM 甘油標(biāo)準(zhǔn)品倍比稀 釋為 1000、500、250125、62.5、31.25、15.625、7.8125 µmol/L,通常取其中 4~6 管即可, 注意設(shè)置 0 濃度對(duì)照反應(yīng)管

 

. 甘油濃度測(cè)定:

1.參見(jiàn)下表進(jìn)行加樣。為使反應(yīng)時(shí)間盡量一致,減小實(shí)驗(yàn)誤差,可先加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣品,然后再加入工作溶液。(注意:當(dāng)甘油濃度較低時(shí),可將待測(cè)樣品與工作溶液按照   100µl:100µl體積混合,然后再進(jìn)行測(cè)定,但是如果樣品體積超過(guò)  100µl    時(shí)將會(huì)稀釋工作液中酶的濃度,使 反應(yīng)靈敏度下降。如果待測(cè)樣品濃度超過(guò)線性范圍,可進(jìn)行適當(dāng)稀釋,然后根據(jù)稀釋倍數(shù)來(lái)計(jì)算樣品中甘油濃度。)

2.37oC 25oC 反應(yīng) 15 分鐘。反應(yīng)平衡后顏色在 60 分鐘內(nèi)穩(wěn)定。 3.先用蒸餾水+工作液的空白管調(diào)零,然后測(cè)定各管 OD 值。

4.制標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算甘油濃度。

Excel 作圖步驟:各標(biāo)準(zhǔn)管 OD 值為 y 軸,標(biāo)準(zhǔn)品濃度為 x 軸。(1)鼠標(biāo)左鍵圈住數(shù)據(jù),點(diǎn)擊

做圖向?qū)?,選擇-散點(diǎn)圖-,點(diǎn)擊-完成-(2)鼠標(biāo)右鍵點(diǎn)圖上的某一點(diǎn),點(diǎn)擊-添加趨勢(shì)線-,點(diǎn)擊

-選項(xiàng)-,點(diǎn)擊-顯示公式--R2    

 

液體樣本甘油檢測(cè)試劑盒這么操作更準(zhǔn)確

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