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脫氧雪腐鐮刀菌烯醇酶免檢測試劑盒真的特別好用

更新時間:2020-07-16      瀏覽次數(shù):1346

脫氧雪腐鐮刀菌烯醇酶免檢測試劑盒真的特別好用

上海信帆生物供應脫氧雪腐鐮刀菌烯醇酶免檢測試劑盒,該產(chǎn)品是我司明星產(chǎn)品,深受廣大科研用戶青睞,質(zhì)量穩(wěn)定,大家可隨時咨詢!

脫氧雪腐鐮刀菌烯醇酶免檢測試劑盒,試劑盒采用固相酶聯(lián)免疫間接競爭法測定脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON,又稱嘔吐毒素),適用于玉米、大麥、小麥等谷物及其制品,飼料及其原料中玉米赤霉烯酮的快速篩查,分析時間小于1小時。

【適用范圍】 本試劑盒可定性、定量檢測小麥、面粉等谷物及其加工制 品和飼料中的嘔吐毒素

【樣本前處理步驟】

一、面粉、小麥等谷物及其加工制品(稀釋倍數(shù):10) 1. 取 5.0g 粉碎好的樣品,加入 25mL 去離子水,混勻; 2. 充分振蕩 15min 后過濾或 4000rpm 離心 5-10min; 3. 取 500μL 濾液或上清液加 500μL 樣品稀釋液(試劑盒中 提供),充分混勻后即為待測樣液; 4. 移取該液 50uL 進行檢測。

二、麩皮、豆粕等(稀釋倍數(shù):10) 1. 取 5.0g 粉碎好的樣品,加入 25mL 去離子水,混勻; 2. 充分振蕩 15min 后過濾或 4000rpm 離心 5-10min; 3. 取 500μL 濾液或上清液加 500μL 去離子水,充分混勻后 即為待測樣液; 4. 移取該液 50uL 進行檢測。

 

三、玉米粉、雞料、鴨料、豬料等(稀釋倍數(shù):10) 1. 取 5.0g 粉碎好的樣品,加入 25mL 去離子水,混勻; 2. 充分振蕩 15min 后過濾或 4000rpm 離心 5-10min; 3. 取 500μL 濾液或上清液加 500μL 20%甲醇-水,充分混勻 后即為待測樣液; 4. 稀釋后的待測樣液需 pH 值約 7.0 左右,移取該液 50uL 進 行檢測。

注意事項:

1. 試劑及樣本沒有恢復到室溫(20~25℃)會導致所有標準 的 OD 值偏低。

2. 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出現(xiàn)標準 曲線不成線性,重復性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應 立即進行下一步操作。

3. 每種試劑使用前均需搖勻。

4. 反應終止液為 2M 硫酸,避免接觸皮膚。

5. 不要使用過了有效期的試劑盒;也不要摻雜使用過了有 效期的試劑盒;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。

6. 儲存條件:試劑盒保存于 2~8℃,不能冷凍,將不用的 微孔板重新真空密封。標準物質(zhì)和無色的顯色劑對光敏 感,因此要避光保存。 7. 試劑變質(zhì)的跡象:顯色試劑有任何顏色表明顯色劑變質(zhì), 應當棄之。0 標準的吸光度(450/630nm)值小于 0.5 (A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質(zhì)。

8. 對玻璃器皿和DON溶液消毒用次氯酸鈉(10%,v/v) 溶液浸泡過夜。

9. 該試劑盒采用室溫反應(20~25℃),當反應溫度高于 25℃或者低于 20℃時,均需相應縮短或延長反應時間, 具體可咨詢

【概要】

嘔吐毒素(Vomitoxin),化學上稱作脫氧腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON),屬于霉菌的單端孢菌素族,具有很高的細胞毒性及免疫抑制性質(zhì),是由幾種粉色鐮刀霉真菌屬產(chǎn)生的。玉米中容易產(chǎn)生這種毒素。嘔吐毒素在小麥、玉米以及稻米中的含量通常是mg/kg級。DON屬于劇毒或中等毒物,人畜攝入了被DON污染的食物/飼料后,會導致厭食、嘔吐、腹瀉、發(fā)燒、站立不穩(wěn)、反應遲鈍等急性中毒癥狀,嚴重時損害造血系統(tǒng)造成死亡。研究表明,DON可能對免疫系統(tǒng)有影響,有明顯胚胎毒性和一定致畸作用,可能有遺傳毒性,但無致癌、致突變作用。谷物及飼料中DON的含量有嚴格的*。我國谷物中DON 的*為1.0 mg/kg 。HPLC或GC-MS用作檢測嘔吐毒素的方法,但是其前處理步驟繁瑣,費用昂貴。酶聯(lián)免疫檢測試劑盒則可經(jīng)濟、快速地檢測嘔吐毒素。

 

【試驗原理】

  嘔吐毒素檢測試劑盒又稱脫氧雪腐鐮刀菌烯醇檢測試劑盒,本試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在酶標板微孔條上預包被嘔吐毒素抗原,樣本中嘔吐毒素和此抗原競爭結(jié)合抗嘔吐毒素抗體(抗試劑),同時嘔吐毒素抗體與酶標二抗(酶標物)相結(jié)合,經(jīng)TMB底物顯色,樣本吸光值與其所含嘔吐毒素的含量成負相關(guān),對照標準曲線,再乘以其對應的稀釋倍數(shù),即可得出樣品中嘔吐毒素的含量。

 

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