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大鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)elisa試劑盒有關(guān)知識(shí)

更新時(shí)間:2017-04-12      瀏覽次數(shù):1390

大鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)elisa試劑盒有關(guān)知識(shí)

肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子是重要的抗纖維化因子,能修復(fù)受損肺組織,是重要的保護(hù)性因子。

?是重要的抗纖維化因子,能修復(fù)受損肺組織,是重要的保護(hù)性因子。肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子是目前已知生物活性zui廣泛的生長(zhǎng)因子之一,能刺激多種上皮和內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂、運(yùn)動(dòng)以及促進(jìn)腎小管形態(tài)發(fā)生,在組織器官損傷修復(fù)、形態(tài)發(fā)生和腫瘤轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮重要作用,在腎臟的發(fā)育、急性損傷、再生中具有較強(qiáng)的作用。

本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷大鼠(Rat)肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA檢測(cè)檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品1. 酶標(biāo)儀(450nm)2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃

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恒溫箱操作注意事項(xiàng)

1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。

2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

3.  濃度為0 的S0 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白;預(yù)處理后OD 值。結(jié)果判斷繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel 工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)OD 值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。

試劑盒性能

1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R 值,大于等于0.9900。

2. 靈敏度:zui低檢測(cè)濃度小于1.0 pg/mL。

3.  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

6. 有效期:6 個(gè)月

大鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)elisa試劑盒有關(guān)知識(shí)

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