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利用新城疫弱毒Clone30株病毒抗原．通過間接ELISA方法對試劑盒的各項反應(yīng)條件進行系列的摸索試驗后，成功地組裝了檢測試劑盒。對ELISA各項反應(yīng)條件進行摸索，并確定了zui適工作條件，研究結(jié)果表明，新城疫病毒抗原*包被濃度為1.086ug／ml，zui適包被條件為4℃過夜，被檢血清*稀釋度為1∶100，酶標結(jié)合物*工作濃度1∶800。待檢血清和酶標二抗的反應(yīng)時間均為37℃30分鐘，底物的反應(yīng)時間為37℃15分鐘。采用已確立的ELISA反應(yīng)條件，檢測14份經(jīng)西班牙海博萊公...

農(nóng)業(yè)是國家的基礎(chǔ)。農(nóng)業(yè)當(dāng)中不可避免的就是蟲害的問題。接下來，我們就討論一下ELISA試劑盒檢測技術(shù)對抗蟲基因植物的研究。眼下應(yīng)用得和zui有潛力的一個抗蟲基因是Bt殺蟲基因，在農(nóng)業(yè)蟲害的防治過程中起到非常重要的作用。雖然現(xiàn)在獲得的轉(zhuǎn)Bt抗蟲基因植物已達近70種，但是新的Bt殺蟲基因仍然不斷的被分離和鑒定，使得轉(zhuǎn)Bt抗蟲基因植物的研究持續(xù)、高速發(fā)展，因此急需找到一種快速、簡便、準確的檢測方法。此ELISA研究實驗以目前抗蟲轉(zhuǎn)基因育種中研究zui多的BtCryIA（C）基因的表達...

從21世紀初期，由于免疫學(xué)研究中一個非常活躍的領(lǐng)域就是細胞因子的研究，它的檢測成為現(xiàn)代生物科學(xué)研究的重要方面。國內(nèi)的生物廠家，運用抗原、抗體反應(yīng)的原理已研制出了高靈敏度（sensitive）、高特異性、高度配套的細胞因子檢測試劑盒，生物試劑的檢測試劑盒涵蓋幾乎所有的細胞因子。依據(jù)檢測方法不同，可分為ELISA測定（酶聯(lián)免疫）和放射免疫測定。1.放射免疫測定放射免疫測定是將同位素分析的高靈敏度與抗原抗體反應(yīng)的特異性相結(jié)合，方法大多采用競爭法原理。待檢的細胞因子與放射性同位素標記...

一、前言近二十幾年來，免疫學(xué)分析方法發(fā)展很快，特別是在使用標記了的抗原和抗體的分析技術(shù)以后，使原來許多經(jīng)典的分析方法在敏感性和特異性方面都不能相比。繼50年代的免疫熒光（IFA）和60年代的放射免疫（RIA）分析技術(shù)之后，在70年代初期又建立了用酶來標記抗原或抗體的分析技術(shù)。由于酶的生物催化作用，一個酶分子在數(shù)分鐘內(nèi)可以催化幾十幾百個底物分子發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生了放大作用，使得原來極其微乎其微的抗原或抗體在數(shù)分鐘后就可被識別出來，這種技術(shù)被稱為酶聯(lián)免疫吸附試驗法（Enzyme—Li...

抗原與免疫原抗原（antigen,Ag），是一類能刺激機體免疫系統(tǒng)使之產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答，并能與相應(yīng)免疫應(yīng)答產(chǎn)物即抗體和致敏淋巴細胞在體內(nèi)或體外發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì)，也稱為免疫原（immunogen）。前一種性能稱為免疫原性（immunogenicity）或抗原性（antigenicity），后一種性能稱為反應(yīng)原性（reactogenicity）或免疫反應(yīng)性（immunoreactivity）?？乖姆诸悾焊鶕?jù)抗原物質(zhì)所具備的性能可分為*抗原（completeantigen）...

《中國科學(xué)報》報道了一種針對蛋白激酶R（PKR）的化學(xué)探針，可以保護巨噬細胞不受毒素影響比如炭疽而中毒死亡。這項研究揭示了PKR在細胞凋亡通路中的新作用，而且與其酶促作用相互獨立。由炭疽桿菌產(chǎn)生的致命毒素是炭疽的致病病因，可以擾亂宿主的各項功能以殺死宿主體內(nèi)的巨噬細胞。這些受感染巨噬細胞的死亡保護宿主免于感染，因此弄清促使細胞凋亡的基本機制是重要的。ErikHett、DeborahHung等人進行了一項高通量化學(xué)篩查以試圖找到一種能阻止致命毒素引發(fā)死亡的小分子。他們將PKR作...

據(jù)科技日報報道，美國加利福尼亞大學(xué)圣地亞哥分?？茖W(xué)家通過果蠅實驗，識別出會在傷口附近區(qū)域發(fā)生作用的8個新基因，這些基因很可能在傷口愈合中扮演重要角色。相關(guān)論文發(fā)表在本周的《公共科學(xué)圖書館—綜合》上。研究人員發(fā)現(xiàn)，在調(diào)控果蠅硬質(zhì)外骨骼或外皮生物過程的基因中，有許多也控制著人類皮膚的生物過程，有望成為開發(fā)新型傷口愈合藥或皮膚病治療藥物的*候選。論文*作者、加利福尼亞大學(xué)圣地亞哥分校生物科學(xué)分部臨時院長雷切爾·帕特森教授說：“在果蠅傷口愈合過程中，涉及到許多關(guān)鍵分子和蛋白質(zhì)。果蠅的...

據(jù)科技日報報道，維克森林浸禮會醫(yī)學(xué)中心再生醫(yī)學(xué)研究所（美國）科學(xué)家通過基因工程修改了一種干細胞，使其表達一種常見皰疹病毒的蛋白質(zhì)，從而能躲避免疫系統(tǒng)攻擊，大大提高了存活率。受傷或病變組織因此能爭取更多時間發(fā)揮自身愈合能力，得以治愈。相關(guān)論文發(fā)表在zui近出版的《公共科學(xué)圖書館·綜合》上?！盎旧衔覀兪菐透杉毎[身’，讓體內(nèi)天然‘殺手’T細胞和免疫系統(tǒng)對它們‘視而不見’，這樣它們就能生存下來并促進身體康復(fù)?！闭撐淖髡?、研究所再生醫(yī)學(xué)教授格雷卡·阿爾梅達-普拉達解釋說，“干細胞...

ELISA檢測技術(shù)是20世紀70年代發(fā)展起來的一種檢測技術(shù)，因其具有敏感性高、特異性強、操作簡單等優(yōu)點，被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體的測定，為輔助研究診斷與生物科研起到了積極的推動作用。但ELISA測定中影響因素較多，操作過程中每個環(huán)節(jié)都會對試驗結(jié)果產(chǎn)生影響，出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。現(xiàn)對影響實驗結(jié)果的常見因素及相應(yīng)的控制方法分析探討如下：1試劑的因素1.1試劑的選擇試劑的選擇是保證血液檢測質(zhì)量的關(guān)鍵要素。雖然國家采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān)，但不同廠家的試劑在使用效果上仍...

對于實驗質(zhì)量管理來說的*要素是，選擇和執(zhí)行適當(dāng)?shù)馁|(zhì)量控制（internalqualitycontrol,IQC）程序，例如根據(jù)測定項目的質(zhì)量要求和方法特點選擇統(tǒng)計學(xué)標準、控制規(guī)則和質(zhì)控品的數(shù)目，并嚴格執(zhí)行IQC程序以提高IQC的質(zhì)量。室內(nèi)質(zhì)控方法很多，但酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）中仍主要采用Levey-Jennings質(zhì)控圖。筆者長期從事免疫學(xué)檢驗質(zhì)量管理工作。發(fā)現(xiàn)醫(yī)院、血站檢驗科在實際工作中存在一些比較普遍的問題或疑問。根據(jù)自身實踐經(jīng)驗，結(jié)合相關(guān)專著，簡要介紹如下，供實...